分子生物学仪器的主要特点: 结合了蛋白质组学中的经典双向电泳技术和多重萤光分析技术。
不同样本分别有电荷和分子量匹配的CyDyeDIGE萤光标记物预标记,随后再混合在同一块胶上电泳。引入了内标的概念,更大地提高了结果的準确性、可靠性和重复性。
可以检测到小于10%的蛋白表达差异而统计学可信度达到95%。
分子生物学仪器的操作程序: (1)插上电源,待机指示灯亮;打开电源开关,调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定,温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。
(2)设定机器的工作参数,如工作温度,运转时间,工作转速等。
(3)将预先平衡好的样品放置于转头样品架上,关闭机盖。
(4)按控制面板的运转键,离心机开始运转。在预先设定的加速时间内,其运速升至预先设定的值。
(5)在预先设定的运转时间内(不包括减速时间),离心机开始减速,其转速在预先设定的减速时间内降至零。
(6)按控制面板上的停止键,数码管显示dedT,数秒钟后即显示闪烁的转速值,这时机器已准备好下一次工作。
两种移液方法 1、一是前进移液法。用大拇指将按钮按下至停点,然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至停点排出液体,稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体。松开按钮。 2、二是反向移液法。此法一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体,其原理就是先吸入多于设置量程的液体,转移液体的时候不用吹出残余的液体。先按下按钮至第二停点,慢慢松开按钮至原点。接着将按钮按至停点排出设置好量程的液体,继续保持按住按钮位于停点(千万别再往下按),取下有残留液体的管嘴,弃之。下面介绍3种类型: 一、移液器之正置换移液器:这种移液器与排气式移液器相类似,但是更少用,通常用于避免污染,或用于体积小、挥发性的或有粘性的物质,比如DNA,主要的差别在于其一次性*是一个微量调节,由塑料制成,包括一个活塞,可以直接排出液体。 二、移液器之容积式移液器:不同型号的容积式移液器允许使用极高精度地测量溶液体积,这种移液器有一个较大的球状物,上方与一个狭窄的部分相连,这一部分刻有一条刻度线,仅标识出一个体积。容积式移液器常用于从基本原料中配制溶液,或用于准备滴定液。 三、移液器之刻度移液器:刻度移液器,又称刻度吸管、有刻度移液管等,是一种大型移液器,包含一个有一系列刻度线的长筒,类似于量筒或滴定管,表示不同的体积。它也需要制造真空,在早期的化学、生物试验中,实验者会用嘴吸气。6.移液器使用建议:
1)移液时保持正确的姿势;不要时刻紧握移液器,使用带指钩的移液器帮助缓解手部疲劳;有可能的话经常换手操作。
2)定期检查移液器的密封状况,一旦发现密封老化或出现漏液,须及时更换密封圈。
3)每年对移液器进行1-2次校正(视使用频率而定)。
4)绝大多数移液器,在使用前和使用一段时间后,要给活塞涂上一层润滑油以保持密封性;而对于常规量程的移液器,不涂润滑油也同样拥有理想的密封性。