在医学教学、科研和医学工作中,不论是从事基础医学的还是临床医学、预防医学,都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物的实验的观察和分析,来研究和解决医学上存在的许多问题,动物 实验方法 已成为医学科学研究和教学工作中的重要手段。本模型采用离乳大鼠是由于幼鼠在发育期阶段对dan碱的需求量较大,因dan碱缺乏造成对机体伤害的敏感性自然比成年动物更强。动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一些基本方法都是共同性的,如动物的选择、抓取、固定、、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等,不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法,因此,动物实验基本方法,已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。
实验动物的给法
(一)注she给药法
1. 皮射 注she时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;小鼠关节yan模型根据tong风性关节yan发生的特点,模型构建一般采用踝关节或膝关节注射尿酸钠(MSU)的方法。兔在背部或耳根部注she;蛙可在脊背部淋巴囊注射;狗多在大腿外侧注she,拔针时,轻按片刻,防药液逸出。
2. 皮内注she 此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的性同位素溶液、颜料或致炎物质、等注入皮内,观察其消失速度和局部血液循环变化,作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是:将动物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内,然后使针头向上挑起并再稍刺入,即可注射药液。动物选择选择好适合研究需要的实验动物是获得正确实验结果和实验成功的重要环节。注射后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。
3. 肌肉注she 当给动物注she不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的时,常采用肌肉注she。肌肉注she一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位,多选臀部。
注she时针头要垂直快速刺入肌肉,如无回血现象即可注she。给大、小鼠作肌肉注she时,选大腿外侧肌肉进行注she。
4. 腹腔注she 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。
5. 静脉注she 是将药液直接注she于静脉管内,使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快,作用时间较短。
小鼠、大鼠的静脉注she:常采用尾静脉注she。鼠尾静脉共有3根, 左右两侧和背侧各1根,两侧尾静脉比较容易固定,故常被采用。方法是用剪毛刀在动物一侧或背部剪出号码,此法编号清楚可靠,但只适于短期观察。操作时,先将动物固定在暴露尾部的固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替),用75%酒精棉球反复擦试使血管扩张, 并可使表皮角质软化,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,注she时针头尽量采取与尾部平行的角度进针。
睡眠剥夺模型
实验用金属箱直径35 cm, 每箱装1只大鼠。REMSD 各组分别置于直径为6.5 cm的小站台上,对照组大鼠置于直径15 cm的大站台上,周围是水环境,水深3 cm,平台在水面以上1 cm,于平台以上14 cm 处放笼罩,上面放水和食物。水温和室温保持在25 C,每日换水并打扫实验箱。REMSD 组大鼠在小台上屈曲而立,在快动眼睡眠(rapid eye movement sleep, REMS) 时,由于伴随全身肌肉松弛和节律性垂头,大鼠落入水中而惊醒,再爬上站台。操作人员用左手把穿刺点周围的皮肤绷紧,右手将穿刺针在穿刺点垂直刺入,穿入固定后,轻轻左右旋转将穿刺针钻入,当穿刺针进入腔时常有落空感。用此方法自18:00开始连续剥夺大鼠的REMS至相应实验时间点。
旷场实验( open field test, OFT )
实验装置为高60 cm、 底面边长100 cm、内壁涂黑的无盖方箱,底面平均分为25个小方格,正上方2 m处架一摄像机,镜头对准箱底,实验在安静环境下进行,大鼠置于方箱底面中心,同时进行摄像和计时,3 min 后停止摄像,更换动物后,继续进行实验。2次实验之间清洗箱壁及底面,以免上次动物余留的信息影响下次实验结果。计分方法:通过放像设备,观察大鼠3 min内越过的格子数为水平得分,后肢站立次数为垂直得分,两者之和为OFT总得分。狗的胰总管开口于十二指肠降部,在紧靠肠壁处切开胰管,结扎固定并与导管相连,即可见无色的胰液流入导管。REMSD实验前后均进行旷场实验。
科学家利用电子芯片技术遥控瘫痪实验鼠行走
据国外媒体报道,科学家创造了一种“遥控”实验小鼠。这使瘫痪的动物能够使用电子植入技术走路。 帮助一些因脊髓损伤而瘫痪的人接受康复治liao并使其行走更加自然。”科学家使用嵌入式芯片来远程使实验室鼠标的步态瘫痪。帮助人类再次行走。实验过程中的实验小鼠中间脊髓被切断,大脑信号无法发送到下脊髓,但是可以通过神经植入物将电流发送到脊髓神经,因此跑步机可以走路科学家可以通过改变电信号来控制实验大鼠的行为。在实验中,鼠标走了1,000步,挑战了各种高度和长度的楼梯。 洛桑瑞士联邦技术学院的Gregoire Coultine是这项研究的主要研究者。刺激脊髓,使实验小鼠自然行走。您可以实时控制实验鼠标的前进方式和腿的高度。实验动物大、小鼠的采血方法1、动物实验中剪尾采血:需血量少时可用此方法。该研究是欧洲个神经步行项目的一部分,也是个计划的项目。明年夏天将在人类患者身上进行测试。科学家设计了一种用于临床试验的人性化设备。瑞士洛桑联邦理工学院的Silvestro Micera博士补充说:英国“废除解剖学”的Jarrod Bailey博士对此研究表示谴责。他指出:“正在进行实验的实验小鼠会遭以想象的困扰,公众将不会支持这项研究,不会割断和瘫痪动物的脊椎,并会对人类造成长期的脊髓损伤。”无法进行模拟。