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GC色谱的发展与下面两个方面的发展是密不可分的。一是气相色谱分离技术的发展,二是其他学科和技术的发展。1952年James和Martin提出气液相色谱法,同时也发明了个气相色谱检测器。这是一个接在填充柱出口的滴定装置,用来检测脂肪酸的分离。用滴定溶液体积对时间做图,得到积分色谱图。以后,他们又发明了气体密度天平。1954年Ray提出热导计,了现代气相色谱检测器的时代。此后至1957年,是填充柱、TCD年代。
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液相色谱柱的五大填装方法
1.高压匀浆法装填
2.湿法装填
3.干法装填
4.等密度法装填
5.高粘度法装填
目前大多数实验室是购买商品预填装柱来满足分离、分析之需。液相色谱柱、特别是液相色谱柱的填装,需要有较高的技巧和熟练的技能。因此,有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。
但是只要掌握了一些基本的规律和方法,任何实验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。
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在HPLC发展的早期,常采用“等密度法”来填装柱。多孔硅胶的骨架密度较高。例如,LiChrospher 100的表观密度约为2.3g/cm3,LiChrospher 500 为2.46g/cm3,LiChrospher 1000 为2.49g/cm3。不同牌号的硅胶因制法不同(例如,含有超细孔和封闭孔者表观密度小)而有差异,但多在2.2g/cm3以上。因此,需以高密度溶剂配制密度与硅胶骨架密度相近的混合液。常使用的高密度溶剂为碘代和代烷类(表12-2-3),再与适当比例的其他溶剂相配,配制出具有密度适宜的液体,使填料能呈“失重”状态悬浮于匀浆液中,以从容地用高压泵将其压入空色谱柱中,制出填装均匀的色谱柱。
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