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当柱直径发生变化时,对流速进行必要的改变以保持恒定的线速度是相当简单的。减小柱径有助于节省溶剂和提高检测限。但是对于较小直径的色谱柱,可能会观察到系统性能的下降。从故障排除的角度来看,很容易将系统性能不佳归咎于色谱柱本身,而真正的罪魁祸首可能是 LC 系统的柱外体积。对柱外效应的相对不敏感是填充直径 5 µm 颗粒的4.6 mm × 150mm 色谱分析柱可能在未来许多年内仍然是常规 LC 工作的主力色谱柱的原因之一。
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高i效液相柱选用的基本原则
(1)选用经过烷i基化处理封口的填料可防止碱性化合物的拖尾现象。
(2)选用含碳量高的柱子,增加保留值。
(3)选用较短的柱子(如15 cm,7.5 cm)。
(4)选用小颗粒度的填料。
(5)对分子量大的组分选用大孔径填料的柱子。
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将选用的柱子仔细以乙醇或丙i酮清洗干净,并以干净的热风吹干。如柱管内壁污染较重,也可以用表面活性剂及去离子水依次清洗,并以长竹签或塑料棒扎上棉纱或纱布往复抽擦,以除去污垢。但应注意不要伤及内壁表面的光洁度,尤其不能造成轴向的划痕。将清洁的柱管的一端装配上带滤板的柱头,另一端则连接至匀浆罐上。
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