动物模型设计的注意事项
注意模型要尽可能再现所要求的人类疾病
模型时必须强调从研究目的出发,熟悉诱发条件、宿主特征、疾病表现和发病机理,即充分了解所需动物模型的全部信息,分析是否能得到预期的结果。例如诱发动脉粥样硬化时,草食类动物兔需要的胆固醇剂量比人高得多,而且病变部位并不出现在主动脉弓。病理表现为纤维组织和平滑肌为主,可有大量泡沫样细胞形成斑块,这与人类的情况差距较大。因此要求研究者懂得,各种动物所需的诱发剂量、宿主年龄、性别和遗传性状等对实验的影响,以及动物疾病在组织学、生化学、病理学等方面与人类疾病之间的差异。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出,采血后,消毒,止血。要避免选用与人类对应相似性很小的动物疾病作为模型材料。为了增加所动物疾病模型与人类疾病的相似性,应尽量选用各种敏感动物与人类疾病相应的动物模型,可参考相关文章《各种敏感动物与人类相似的疾病模型》。
很多自发性动物模型在研究人类疾病时具有重要的价值,如自发性大鼠,中国地鼠的自发性真性,小鼠的各种自发性,山羊的家族性等。利用这类动物疾病模型来研究人类疾病的优点,就是疾病的发生并发展与人类相应的疾病很相似,均是在自然条件下发生的疾病,其应用价值就很高,但是这类模型来源较困难,不可能大量应用。由于诱发模型和自然产生的疾病模型是有一定差异的,如诱发的和自发的对的敏感性是不相同的,加之有些人类的疾病至今尚不能用人工的方法在动物身上诱发出来,因此,近年来十分重视对自发的动物疾病模型的开发,有的学者甚至对狗、猫的疾病进行大规模的普查,以发现自发性疾病的病例,然后通过遗传育种,将这种自发性疾病模型保持下来,并培育成具有特定遗传性状的突变系,以供研究。近年来许多动物遗传病的模型就是通过这样的方法建立的。匹罗卡品致大鼠癫xian模型近年来一直被认为是研究颞叶dian痫的理想模型。在这方面小鼠和大鼠的各种自发性疾病模型开发和应用得。这类模型在遗传病、代谢病、缺陷病、疾病和等方面的应用正日益增多。1 被动吸烟模型
(1)方法实验豚鼠(雌雄不限),将豚鼠置放在封闭的通气隔离包中,每天暴露在xiang烟烟雾环境中(10支/次,1次/d,5d/周,连续1, 3, 6, 12个月作肺组织病理学及肺功能检查),即可建立模拟人类吸烟引起的动物模型。
(2)模型特点本模型病理表现 为进行性肺泡腔扩大、肺功能减退,造模12个月后即使停止给予动物烟雾暴露环境,模型动物肺泡腔的病理学改变仍可呈进行性发展,不能恢复正常。模型动物出现的百分比、病变轻重程度与吸烟时间密切相关;因模型时间较长,实验过程中影响因素较多,模型的稳定性相对较差。小鼠关节yan模型根据tong风性关节yan发生的特点,模型构建一般采用踝关节或膝关节注射尿酸钠(MSU)的方法。
2 蛋白酶模型
(1)方法成年大鼠(雌雄不限),经yi醚后仰卧固定头部及四肢,轻拉鼠舌,压迫舌腹,在额镜直视下,趁大鼠呼吸瞬间,迅速将已装有木瓜蛋白酶溶液连有的细塑料插管插入达气管分叉处,随后慢慢推入木瓜蛋白酶(2mg/kg体重)溶液,注入溶液体积控制在0.2ml/100g体重或以下。滴完溶液后,可辅助大鼠作各种直立、旋转等动作,以便所滴溶液在大鼠肺内均匀分布,然后大鼠自由饮水进食。动物模型设计的注意事项注意模型要尽可能再现所要求的人类疾病模型时必须强调从研究目的出发,熟悉诱发条件、宿主特征、疾病表现和发病机理,即充分了解所需动物模型的全部信息,分析是否能得到预期的结果。
(2)模型特点大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化,肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65%,而到第8日就不再变化,而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。病理组织学检查模型大鼠在发生早期(1周以内)主要是肺泡上皮细胞发生了破坏,而在晚期阶段则可见Ⅱ型肺泡上皮细胞增多,以及肺泡间隔内局限性胶原纤维及弹性纤维的聚集。此方法属于腹膜炎攻击方法的一种,主要是通过手术方式将小鼠自身盲肠内容物释放到腹腔造成gan染,从而模拟脓毒症的发生和发展。但本模型(犬)在测定肺功能时表明,动物呼气流速的下降与静态顺应性的下降不成比例,同时病理组织学也证实动物气道萎缩,气道病变说明本模型不是单纯性的较佳模型。
多样硬化模型(EAE)
EAE模型可由来自髓鞘的蛋白如髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG))和完全弗氏佐剂(CFA)免yi诱导,mian疫当天及两天后腹腔注she百ri咳毒su(PTX)而构建。髓磷脂特异性T细胞在外周被ji活,穿过血脑屏障进入zhong枢神经系统并被重新ji活,引发一系列yan症反应,导致脱髓鞘和轴突细胞凋亡,zui终导致神经损伤和失去功能。使用标准化评分系统评估临床症状,衡量疾病的诱导发生程度。B组在灌注后第7天始每隔3d处死3只解剖观察膀胱肿liu生长情况及有无转移,并取qi官组织(膀胱、shen、输尿管。病理组织染色切片 可见局部脱髓鞘和炎性白细胞浸润。百奥赛图利用自主开发制备的B-h17A人源化小鼠(敲除小鼠IL-17A基因,同时敲进人IL-17A基因)为针对人IL-17A靶点的MSzhi疗yao效研究提供了一个可靠的MOG诱导的EAE模型。